動(dòng)物血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用
點(diǎn)擊次數(shù):4940 日期:2015/11/25 13:41:06
在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)基中要加入
動(dòng)物血清,因其成分十分復(fù)雜,其功能并不明確。本文從血清的成分入手,逐一分析各成分在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中的作用,從而解決高中教學(xué)中的相關(guān)問(wèn)題。
一、血清及其成分血清是血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。從成分上看動(dòng)物血清的成分主要包括:水90.7 血清白蛋白4.4血清球蛋白2.1氨基酸氮0.005 尿素氮0.012其他非蛋白氮0.025葡萄糖0.08乳糖0.025各種脂肪酸0.38脂肪0.14卵磷脂0.2膽固醇0.22鈉離子0.38鉀離子0.02鈣離子0.01鎂離子0.0035 亞鐵離子0.0001氯離子0.36磷酸氫根離子0.0l硫酸根離子0.001碳酸氫根離子0.17DPG SGOT 各種激素酶堿基各種氨基酸(以上數(shù)據(jù)均為百分比)。從成分上看血清在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中的作用是很復(fù)雜的。
二、各成分的功能1.可以起到營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用
動(dòng)物在代謝的過(guò)程中所需的營(yíng)養(yǎng)包括水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、糖類、脂肪、氨基酸和纖維素等。這些成分動(dòng)物血清都可以提供給體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞,但這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(除水以外)的含量在動(dòng)物血清中所占的比例很少,而且主要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基的配制中已經(jīng)添加了。所以,從這些角度看動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)加入的動(dòng)物血清雖然能起到為培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用,但這并不是主要的作用。
2.可以起到調(diào)節(jié)的作用
動(dòng)物細(xì)胞的代謝離不開調(diào)節(jié)。在動(dòng)物體內(nèi)有兩種調(diào)節(jié)方式來(lái)維持動(dòng)物代謝的穩(wěn)定,而細(xì)胞本身的代謝調(diào)節(jié)中激素調(diào)節(jié)的作用很關(guān)鍵。血清中提供了適量且比例適中的各種各樣的激素來(lái)保證動(dòng)物細(xì)胞離體后的正常代謝。
3.可以為動(dòng)物細(xì)胞提供必需物質(zhì)
在微生物的培養(yǎng)中要為培養(yǎng)的微生物提供生長(zhǎng)因子。同樣動(dòng)物細(xì)胞代謝過(guò)程中有很多物質(zhì)是動(dòng)物細(xì)胞所必需而自身無(wú)法合成的的,例如堿基、維生素、氨基酸等微量物質(zhì),它們的作用非常重要,細(xì)胞需要它們合成核酸和蛋白質(zhì),缺乏要導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)不良甚至死亡;提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力; .提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。這些物質(zhì)都存在于血清中,如果在配制培養(yǎng)基的時(shí)候一項(xiàng)項(xiàng)添加是非常麻煩的。所以加入動(dòng)物血清類似微生物培養(yǎng)中的天然培養(yǎng)基的做法,簡(jiǎn)單方便、效果好。
4.可以為離體的動(dòng)物細(xì)胞提供能量及解毒功能
血清中存在大量的糖類、脂類物質(zhì),這些物質(zhì)可以為動(dòng)物細(xì)胞提供大量的能量。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
5.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的一個(gè)很重要的用途就是用取自燒傷病人皮膚的健康細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),可以獲得大量自身的皮膚細(xì)胞,為大面積燒傷的病人移植。人工皮膚的制備需要培養(yǎng)的細(xì)胞貼附在薄膜上形成皮膚組織,血清就為這個(gè)過(guò)程提供所需因子。
6.起酸堿度緩沖液作用
在動(dòng)物血清中存在豐富的無(wú)機(jī)鹽,還具有很多緩沖物質(zhì),在培養(yǎng)基的酸堿度發(fā)生變化時(shí)起到緩沖作用。
7.提供蛋白酶抑制劑
使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害?傊,動(dòng)物血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,具有極為重要的功
能,更重要的是它含有細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的生長(zhǎng)因子、激素、貼附因子等,這是合成培養(yǎng)基所無(wú)法替代的。此外它還能中和有毒物質(zhì)的毒性。故一般體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)要加入一定量的
小牛血清(10% ~20%)。