HE染色實驗技術服務
點擊次數(shù):11743 日期:2013/12/2 15:57:29
南京森貝伽生物科技有限公司實驗室現(xiàn)可代做小鼠,大鼠,人及兔子等腫瘤組織的HE染色,石蠟切片包埋,免疫熒光,拍照技術服務。您只需要提供檢測的組織、細胞和抗體,我們?yōu)槟瓿山M織包埋、切片、細胞培養(yǎng)、細胞爬片、染色和圖片采集的一站式技術服務。
標本要求:
1.客戶提供人或動物的新鮮或福爾馬林固定的組織,我司負責進行石蠟包埋與組織切片
2.客戶提供人或動物的石蠟包埋組織及處理好的玻片,制備石蠟切片
3.細胞涂片、細胞爬片、組織冰凍切片、組織石蠟切片
(收費標準請來電咨詢)客戶須知:
1、客戶檢測蛋白的種屬,客戶提供實驗分組情況及實驗背景資料,有具體要求請事先說明
2、標本收集與保存:如提供組織塊,事先應以10%的福爾馬林或4%的多聚甲醛固定(后者同時適合免疫熒光檢測)
3、樣本運輸:樣本密封完畢,建議以塑料瓶裝好標本寄送以免路途損壞;如寄送切片則選擇紙盒包裝完好,周圍加以泡沫或紙巾填塞以免路途損壞,常溫寄送即可
4、染色完畢后,照相1-2 張/每切片,如需要圖片分析請事先說明
5、您可自備一抗,也可讓我公司代購。為保證質量,抗體最好為進口單克隆抗體
如有任何疑問,詳情請電話或E-mail 咨詢
公司:南京森貝伽生物科技有限公司
電話:025-66923240
傳真: 025-52797049-808
E-mail:sale@sbjbio.com
一、HE染色簡介
蘇木精-伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。通過它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,以達到準確,完整的病理診斷。HE染色法是組織學、胚胎學、病理學教學與科研中最基本、使用最廣泛的技術方法。
二、HE染色目的
病理學的所有切片,都必須通過一種以上的染料,通過各種不同的方法,將切片中各種不同的物質,在不同染液的作用下,將其顯示出來,使之在光學顯微鏡下,能夠完全的觀看各種結構。例如,HE染色,好質量的切片可以清晰地顯示出許多不同的結構,細胞核著藍黑色,細胞漿著粉紅色,軟骨著藍色等。清晰的結構為診斷提供可靠的依據(jù),因此,染色技術也是病理技術中的重要組成部分,必須不斷地總結,方能提高。如果染色不好,切片染色一團糟,紅藍不分,結構不清,層次不明,影響了鏡下的觀察,直接影響了臨床診斷,染色結果的好壞直接關系到診斷的準確性。
三、HE染色注意事項
標本無論大小離體后均應立即固定。大標本還要按1cm間距剖開,加足固定液。固定液的量一般為標本體積的10倍。固定液的種類較多,適合常規(guī)HE切片的固定液首選10%福爾馬林。固定時間應大于8小時,之后再取材。取材后再用95%酒精(Alcohol)85ml+冰醋酸(Acidaceti) 5ml+福爾馬林 (Formalin) 10ml ( 簡稱AAF 液) 補充固定1~2 小時。組織固定必須徹底以免影響脫水、切片、染色和鏡檢。取材的刀剪要鋒利,避免在取材時用力夾、鋸、壓使組織變形。組織大小一般為1.5cm×1.5cm,厚薄在0.2~0.3cm,細胞豐富的組織如淋巴結要小于0.2cm。形狀要規(guī)則平整,故新鮮標本不宜立即取材。如遇到骨或鈣化組織需脫鈣處理。脫鈣后一定要除酸( 將組織放入2%氫氧化鈉溶液中10分鐘,流水沖洗10分鐘即可)。
四、操作步驟
以石蠟切片為例,HE染色石蠟切片制作的基本過程
1、取材與固定
2、脫水透明
3、浸蠟包埋
4、切片與貼片
5、脫蠟染色
五、染色結果
細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。