蘇丹黑B染色試劑盒說(shuō)明書

點(diǎn)擊下載日期：2014/2/14 9:10:24

一、蘇丹黑B染色試劑盒簡(jiǎn)介
脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑(例如乙醇、乙醚等)。人體的脂肪主要有兩種：1、儲(chǔ)存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、腎、胰腺等部位。2、結(jié)構(gòu)脂肪，如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等)，主要分布于細(xì)胞內(nèi)。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類，呈中性。中性脂肪是儲(chǔ)存能量的方式之一，在氧化時(shí)釋放出能量。
在正常情況下，除了脂肪細(xì)胞外，其他細(xì)胞在光學(xué)顯微鏡下幾乎看不到脂滴，如果細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量脂滴，即為脂肪變性。脂肪變性常見(jiàn)于肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、腎曲管上皮細(xì)胞等。
中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑B、油紅O法等。傳統(tǒng)方法中，常采用蘇丹染料，其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在冰凍切片內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較在原溶劑中的溶解度更大，所以在染色時(shí)染料就從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)，使脂質(zhì)呈現(xiàn)出染液的顏色。
蘇丹黑B染色試劑盒染色時(shí)，標(biāo)本不宜采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用10%的福爾馬林)、也不宜采用石蠟切片，需用冰凍切片或碳蠟切片。主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著，常發(fā)生于肝、腎、心等實(shí)質(zhì)臟器的脂肪變性，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)多數(shù)中性脂肪滴；鑒別和診斷脂肪組織中所發(fā)生的腫瘤及其性質(zhì)。其中，脂肪瘤、脂肪肉瘤、卵泡膜瘤、腎上腺皮質(zhì)腺瘤等行蘇丹黑B染色后，呈陽(yáng)性反應(yīng)；腎透明細(xì)胞癌、卵巢纖維瘤等行蘇丹黑B染色后，呈陰性反應(yīng)。
二、蘇丹黑B染色試劑盒組成
試劑(A): Sudan black B stain 50ml 100ml RT 避光
試劑(B): Nuclear fast red stain 50ml
100ml RT 避光
使用說(shuō)明書 1份
三、自備材料
1、載玻片
2、70%的乙醇
3、蒸餾水
4、顯微鏡
5、甘油明膠封固液
四、蘇丹黑B染色試劑盒操作步驟（僅供參考）
1、新鮮組織低溫切片，一般-20℃～-25℃，如果樣本為脂肪瘤，應(yīng)調(diào)節(jié)到-30℃。
2、冰凍切片5～10μm，以6～8μm為佳，貼于載玻片上。
3、 70%的乙醇稍微浸洗一下。
4、入Sudan black B stain中，浸染15～20min。
5、 70%的乙醇洗去多余染色液。 6、蒸餾水浸洗1min。
7、 Nuclear fast red stain淡染細(xì)胞核5～10min。
8、自來(lái)水稍洗后，蒸餾水稍洗一下。
9、用濾紙吸去切片及周圍的水分，讓其稍微干燥。
10、甘油明膠或阿拉伯糖膠封固。
五、蘇丹黑B染色試劑盒染色結(jié)果
中性脂肪黑色
磷脂灰黑色
細(xì)胞核紅色
六、蘇丹黑B染色試劑盒注意事項(xiàng)
1、脂肪染色，標(biāo)本不宜采用含有乙醇的固定液、也不宜采用石蠟切片，需用冰凍切片。 2、在染色過(guò)程中必須防止染料發(fā)生沉淀。故切片放入染液時(shí)，應(yīng)密封，勿與流動(dòng)空氣相接
觸，避免溶液揮發(fā)時(shí)發(fā)生沉淀。 3、冰凍切片較易著色，復(fù)染時(shí)應(yīng)避免過(guò)染。 4、蘇丹染料容易褪色，應(yīng)密閉保存。
5、甘油明膠封固的樣本，保存時(shí)間不長(zhǎng)。如需長(zhǎng)期保存，可以在蓋玻片與載玻片交界的邊
緣用中性樹(shù)膠封閉。
6、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
七、蘇丹黑B染色試劑盒儲(chǔ)存條件：6個(gè)月有效