糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒說明書

點擊下載日期：2014/2/21 10:38:37

一、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒簡介
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一，McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白，該法常用來顯示糖原和其他多糖，該染色液不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)，以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。
過碘酸（又稱高碘酸）是一種強(qiáng)氧化劑，它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1，2-乙二醇基，使之變?yōu)槎�，醛與Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物，產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)，使用時應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間，使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基，又不至于過氧化，這是很關(guān)鍵的步驟。
本糖原PAS染色試劑盒的特點: 采用Leagene特有配方技術(shù)，大大增強(qiáng)了染色效果；性能穩(wěn)定，特異性強(qiáng)；操作簡捷，僅需1h左右。
二、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒組成
試劑(A): 過碘酸溶液 50ml 100ml 500ml 4℃ 避光
試劑(B): Schiff Reagent 50ml 100ml 500ml 4℃ 避光
試劑(C): Lillie-Mayer蘇木素染色液 50ml 100ml 500ml RT 避光
試劑(D): 酸性乙醇分化液 50ml 100ml 500ml
三、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒主要成分：
試劑(A): 主要由過碘酸等組成。
試劑(B): 主要由堿性品紅、偏重亞硫酸鈉等組成。
試劑(C): 主要由蘇木素、乙醇等組成。
試劑(D): 主要由稀酸、乙醇等組成。
自備材料：
1、10%的福爾馬林
蒸餾水或去離子水
3、95%乙醇
4、無水乙醇
5、封片劑
四、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒操作步驟（僅供參考）
1、常規(guī)固定，常采用10%的福爾馬林，常規(guī)脫水包埋。
2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水；冰凍切片直接入蒸餾水。
3、自來水沖洗2～3min，再用蒸餾水浸洗2次。
4、置于過碘酸溶液中，室溫放置5～8min，一般不宜超過10min.
5、自來水沖洗1次，再用蒸餾水浸洗2次。
6、樣本放入Schiff Reagent，置于室溫陰暗處，浸染10～20min。
7、自來水沖洗10min。
8、樣本置于Lillie-Mayer蘇木素染色液中，染細(xì)胞核1～2min。
9、酸性乙醇分化液分化。
10、自來水沖洗10～15min后，更換雙蒸水清洗，使其返藍(lán)。
11、逐級常規(guī)乙醇脫水。
12、二甲苯透明。
13、中性樹膠封固。
五、糖原PAS過碘酸雪夫染色試劑盒染色結(jié)果：
PAS反應(yīng)陽性物質(zhì)（糖原或多糖）紅色或紫紅色
細(xì)胞核藍(lán)色
細(xì)胞質(zhì) 深淺不一的紅色
備注：顏色深淺很大程度上取決于樣品在過碘酸溶液和Schiff Reagent中作用時間的長短。

陰性對照(可選)：
1、對照切片可以用唾液，取唾液片（過濾后用）處理30～60min后，與其他切片共同入過碘酸溶液。
2、對照片可以淀粉酶，取淀粉酶1g于雙蒸水或PBS(pH5.3) 100ml，處理30～60min后，與其他切片共同入過碘酸溶液。
3、如果對照片采用其自身樣本，對照片不經(jīng)過碘酸溶液這一步，直接入Schiff Reagent。染色結(jié)果：對照片呈陰性反應(yīng)，無紫紅色顆粒。
六、注意事項：
1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈，否則影響染色效果。
2、過碘酸氧化時間不宜過久，氧化時的溫度以18～22℃最佳。
3、試劑(A)、 (B)應(yīng)置于4℃密閉保存，使用時避免接觸過多的陽光和空氣。使用前，最好
提前30min取出恢復(fù)到在室溫后，避光暗處使用。
4、酸性乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液，其分化時間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和酸性乙
醇分化液的新舊而定，另外分化后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠。
5、在過碘酸溶液和Schiff Schiff Reagent中作用時間非常重要，該依據(jù)切片厚薄、組織
的類別等決定。
6、本試劑盒常用于常規(guī)組織切片染色，對于真菌、細(xì)胞、極其薄的切片，建議采購糖原PAS染色試劑盒（細(xì)胞真菌專用）, 因為其過碘酸溶液和蘇木素溶液濃度更低，不宜過染。 7、冷凍切片染色時間盡量要短。
8、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
七、有效期： 6個月有效。

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